Biologia jestwyzwaniem dla wielu powodów. Jednym z tych powodów jest trudność w badaniu makrocząsteczek — cząsteczki zawierające setki lub tysiące mniejszych jednostek molekularnych nawleczone razem. Jeśli tylko jeden lub dwa mniejsze jednostki molekularne są wyciągane , makrocząsteczki zmiany ich właściwości. Biolodzy trzeba jakoś mierzyć bardzo niewielkie zmiany w bardzo dużej cząsteczce . Oczywiście , ” duży ” , nie oznacza, wystarcza do obsługi lub zobaczyć duży , więc biolodzy potrzebują specjalnych narzędzi , aby dokonać takich pomiarów . Suszenie jest jednym z tych narzędzi . Żel do elektroforezy
Wszystkie techniki blot zacząć elektroforezy żelowej . Żel jest mniej więcej cienkiej prostokąta żelatyny . Niewielka ilość specjalnie przygotowanych cząsteczek biologicznych jest na żelu na jednym końcu , po czympole elektryczne jest przykładane od jednego końca dodrugiego. Przygotowane cząsteczki elektrycznie naładowany , więcpole elektryczne ciągnie je przez żel. Poruszają się powoli , aż do gęstego żelupole jest wyłączony. Lżejsze cząsteczki wciągnięty szybciej i przejść dalej , cięższe cząsteczki dłużej poruszać , więc nie zrobić to tak daleko .
Korzystanie Żele
< p> W praktyce , kilka różnych próbek umieszcza się rozprzestrzeniać się wzdłuż jednej z krawędzi żelu. Popole elektryczne , różne próbki rozłożone pozycji na przeciwległej krawędzi żelu. Rozpiętość każdej próbki zwany” pas „. Ścieżka ma zwykle kilka różnych pasm odpowiadających cząsteczek o różnych masach w każdej próbce. Istnieje kilka różnych sposobów dokonywania pasma widoczne . Analizując żel daje biologów pomysł na wielkość poszczególnych cząsteczek , ale aby uzyskać więcej informacji , potrzebna jestinna metoda . To miejsce, gdzie blot przychodzi .
Blottingu
Blottingu jestsposób podejmowania cząsteczki , które oddalają się od siebie w żelu i udostępnienie ich na więcej analiza . Wtaki sam sposób, bibuły wchłania atrament — lub luźne jak w czasach, kiedy ludzie wykorzystywane wieczne pióra — blot biologicznych ” wchłania ” cząsteczki z żelem do innego materiału . Cząsteczki końca w tym samym wzorze, ale teraz w specjalnym papierem lub folią. Cząsteczki wiąże się z arkuszem , tak , że nie więcej przejść , a następnie mogą być moczone w roztworze innych cząsteczek sondy , które dostarczają więcej informacji o cząsteczkach. Istnieje kilka różnych sposobów prowadzenia tych czynności , ale zasada jest taka sama dla wszystkich z nich .
Południowej , Północnej i Blottingu
Biolog byłEdwin Południowa pierwsze opracowanie sposobu blotting . Rozwinął wszystkie dane niezbędne do być pewni, że elektroforeza żelowa DNA mogą być przenoszone i precyzyjnie mierzy w materiał suszenie . Ta metoda została nazwana jego imieniem : Southern blot . Inni naukowcy zorientowali się, jak zrobić taką samą ogólną pracę technika RNA i — w fun-loving typowego naukowca stylu — nazywa ich szczegółowe metody Northern blot . Następnieprocedura została zmodyfikowana dla białka pomiaru i nazwano Western blotting. Wszystkie trzy techniki używać tych samych zasad: . Środki Southern DNA , RNA środki Północne , zachodnie środki białka